微生物薄膜過濾法的計數結果計算主要基于微生物限度檢測儀的濾膜上截留的微生物菌落數，結合過濾體積和稀釋倍數進行推算，核心公式為：
CFU/mL=濾膜上菌落數×稀釋倍數/過濾體積（mL）

具體計算步驟與注意事項如下：

一、計算步驟

1. 菌落計數

• 培養結束后，統計濾膜上的菌落數。

• 關鍵要求：選擇菌落數在30-300之間的平板進行計數，以確保結果準確性。若菌落數過多（如超過200個），需重新稀釋樣品并過濾。

2. 確定稀釋倍數

• 若樣品在過濾前進行了稀釋（如將10mL樣品加入90mL無菌水中，稀釋倍數為10倍），需記錄稀釋倍數。

• 若未稀釋，稀釋倍數為1。

3. 計算微生物濃度(示例)

• 過濾體積：100mL

• 稀釋倍數：10倍

• 濾膜上菌落數：124個

• 計算：
  $CFU/mL=\frac{124\times 10}{100}=12.4\text{CFU/mL}$

• 若需計算每升樣品中的微生物數量，則乘以1000：
  $12.4\times 1000=12400\text{CFU/L}$

• 將菌落數乘以稀釋倍數，再除以過濾體積（mL），得到每毫升樣品中的微生物數量（CFU/mL）。

二、特殊情況處理

1. 菌落蔓延生長

• 若菌落蔓延成片，無法區分單個菌落，則該平板不宜計數，需重新實驗。

2. 稀釋級平行性要求

• 若同稀釋級兩個平板的菌落平均數不少于15，則兩個平板的菌落數不能相差1倍或以上，否則需重新實驗。

3. 延長培養時間

• 霉菌、酵母菌培養時間可延長至5-7天，以充分生長并計數。

三、結果報告

1. 報告內容

• 檢測方法（如薄膜過濾法）、樣品信息、培養條件（溫度、時間）、菌落數及結論（是否符合微生物限度標準）。

2. 標準對比

• 根據藥典或行業標準（如中國藥典、美國藥典），判斷樣品是否合格。

• 示例：若標準要求每毫升樣品中微生物數量不超過100CFU，則上述計算結果（12.4 CFU/mL）符合標準。

四、操作要點

1. 無菌操作

• 確保過濾、培養等環節無菌，避免污染。

2. 濾膜選擇

• 根據微生物大小選擇合適孔徑的濾膜（如0.45μm）。

3. 沖洗濾膜

• 使用無菌緩沖液沖洗濾膜，去除殘留雜質和微生物抑制劑。

4. 培養基選擇

• 根據微生物類型選擇適宜的培養基（如營養瓊脂培養基、玫瑰紅鈉瓊脂培養基）。